常見分光光度計分類、用途及使用注意事項
一、常見分光光度計及其用途
(1)可見分光光度計
用來測量待測物質(zhì)對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。可在600nm測定細菌細胞密度。
(2)紫外可見分光光度計
紫外可見光譜儀用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度,紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。
單光束:適于在給定波長處測量吸光度或透光度,一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。
雙光束:自動記錄,快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復雜,價格較高。
假雙光束也就是比例雙光束,它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束,一束直接到達檢測器,另一束通過樣品后到達另一個檢測器。這種儀器的優(yōu)點是可以監(jiān)測光源變化帶來的誤差,但是并不能消除參比造成的影響。
(3)紅外分光光度計
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣,紅外光譜法的特點是:快速、樣品量少(幾微克~幾毫克),特征性強(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
(4)熒光分光光度計
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,應用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領(lǐng)域,通過對這些參數(shù)的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
(5)原子吸收分光光度計
主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一,是材料分析及質(zhì)量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
二、分光光度計使用注意事項
(1)分光光度計應放在干燥的房間內(nèi),使用時放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上,室內(nèi)照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風,防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
(2)分光光度計使用前,使用者應該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理,以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前,應該對儀器的安全性能進行檢查,電源接線應牢固,通電也要良好,各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應該正確,然后再按通電源開關(guān)。
(3)分光光度計在儀器尚未接通電源時,電表指針必須于“0”刻線上,若不是這種情況,則可以用電表上的校正螺絲進行調(diào)節(jié)。